Czynnik uwalniający histaminę ma prozapalną rolę w mysich modelach astmy i alergii ad 5

Jednak PCA indukowane przez niereaktywne pod względem HRF IgE było niewrażliwe na leczenie GST-N19. Podobne wyniki obserwowano przy użyciu GST-H3 w miejsce GST-N19, a GST-N19 plus GST-H3 wykazywały silniejszy efekt supresyjny PCA niż sam GST-N19 lub GST-H3 (dodatkowa Figura 10). Wyniki te sugerują, że HRF jest wymagany do maksymalnych reakcji PCA wywołanych IgE / antygenem. Zgodnie z tym, HRF dramatycznie zwiększył się w skórze właściwej podczas LPR (Supplemental Figure 11). Inhibitory HRF hamują zależne od komórek tucznych zapalenie dróg oddechowych. Astma jest przewlekłą chorobą płuc charakteryzującą się zapaleniem dróg oddechowych, nadreaktywnością dróg oddechowych (AHR) i odwracalną niedrożnością dróg oddechowych (41). Zastosowaliśmy zależny od komórek tucznych model zapalenia dróg oddechowych wywołany OVA (42). Oprócz zwiększonego poziomu HRF w płucach i krwi (Figura 6A), mikroskopia immunofluorescencyjna wykazała zwiększone poziomy barwienia HRF w niepermeabilizowanych tkankach płucnych (Suplementowa Figura 12A), co wskazuje, że HRF jest wydzielany do tkanek płuc u myszy prowokowanych OVA. Poziomy reaktywnej wobec HRF IgG również zwiększały się w osoczu i płynach BAL tych myszy (dodatkowa figura 12B). Wstępne traktowanie GST-N19 przed wyzwaniem OVA znosiło zapalenie dróg oddechowych, czego dowodzą zmniejszone granulocyty eozynochłonne i neutrofile w płynach BAL (Figura 6B) i przez zmniejszone komórki zapalne i przerost komórek kubkowych w płucu (Figura 6C). Wytwarzanie IL-13 (cytokiny niezbędnej dla AHR, eozynofilia i wytwarzanie śluzu, pozycje 43-45) i IL-5 (cytokina krytyczna dla eozynofilii i AHR, odnośnik 46) w tkankach płuc drastycznie zmniejszyła się w GST- Myszy traktowane N19C (Figura 6D). Zgodnie z tymi obserwacjami, leczenie GST-N19 hamowało AHR (P <0,05 vs. GST przy 48 mg / ml metacholiny, poprawka Bonferroniego, Figura 6E). Krążące układowe HRF zostało zmniejszone przez GST-N19 (Supplemental Figure 12C), prawdopodobnie odzwierciedlając działanie przeciwzapalne GST-N19. Przeciwnie, poziomy IgG w osoczu reagujące z HRF i poziomy IgE, IgG1 i IgG2a specyficzne dla OVA nie były zakłócane przez GST-N19 (dodatkowa figura 12B i dane nie przedstawione). Podawanie syntetycznego peptydu N19 lub GST-H3 znosiło zapalenie dróg oddechowych z podobną siłą do działania GST-N19 (dodatkowa Figura 13 i dane nie pokazane). Figura 6GST-N19 blokuje zależne od komórek tucznych zapalenie dróg oddechowych. Myszy C57BL / 6 uczulano OVA (10 (Ig) i prowokowano OVA (20 (Ig) lub PBS. Niektóre myszy były wcześniej traktowane GST lub GST-N19 (400 .g) przed każdą prowokacją OVA. 24 godziny po ostatnim prowokacji myszy poddano inwazyjnemu testowi czynności płuc i zebrano płyny BAL i tkanki płucne. (A) Zwiększone ilości HRF w płucach i surowicach myszy z nadwrażliwością i wywołanym OVA. SDS-PAGE przeprowadzono na homogenatach płuc i próbkach surowicy, a ilości HRF 3 myszy oceniano za pomocą immunoblottingu. Ekspresja ERK1 / 2 została użyta jako kontrola obciążenia. (B) Całkowita i specyficzna liczba komórek układu odpornościowego w płynach BAL. Eos, eozynofile; Neu, neutrofile; Lym, limfocyty; M (3, makrofagi i monocyty. (C) Barwienie H & E i okresowym kwasem-Schiffem (PAS) tkanek płucnych. Skalowane pręty: 200 .m. (D) IL-5 i IL-13 w homogenatach płuc mierzono za pomocą testu ELISA. (E) Opór dróg oddechowych mierzono za pomocą FlexiVent. * P <0,05, ** P <0,01, *** P <0,001. Dla każdej kohorty użyto 3. 6 myszy. Wszystkie dane są reprezentatywne dla 3 eksperymentów. Potwierdziliśmy skuteczność GST-N19 w drugim modelu astmy: częściowo zależne od IgE zapalenie dróg oddechowych wywołane przez alergeny Aspergillus fumigatus (47). Hamowanie HRF spowodowało znaczną redukcję alergicznego zapalenia dróg oddechowych i komórek zapalnych w płynach BAL (dodatkowa Figura 14). Co ciekawe, hamowanie HRF nie zmniejszyło zapalenia dróg oddechowych w niezależnym od mastocytów modelu OVA-ałun (odnośnik 48 i Dodatkowa figura 15). Indukowane HRF zapalenie dróg oddechowych zależy od receptorów Fc. Zapalenie dróg oddechowych w powyższych doświadczeniach obejmuje złożoną zależność różnych komórek (41, 49, 50). Aby uzyskać mechanistyczny wgląd w to, w jaki sposób HRF promuje zapalenie płuc, użyliśmy prostszego modelu in vivo. Podawanie WT, ale nie mutanta 2CA, zredukowanej / karboksymetylowanej lub gotowanej myszy mHRF do WT indukowało słabe, ale stałe zapalenie płuc, jak wykazano przez zwiększone eozynofile, neutrofile i makrofagi / monocyty w płynach BAL (Figura 7A i dane nie pokazane) . Jednakże, nie obserwowano ani nie indukowano indukcji HRF zapalenia płuc u pacjentów z niedoborem komórek B ((MT), z niedoborem komórek tucznych (KitWis / Wis sh) lub FcRy3 / r. myszy (Figura 7, A i B). FcR. jest dzielone przez wiele receptorów Fc, w tym FcyRI, FcyRI, FcyRIII i FcyRIV (51, 52) [więcej w: sok z buraka właściwości, polskie towarzystwo ultrasonograficzne, narodowy fundusz zdrowia w łodzi ] [przypisy: syrop tymiankowy złożony, narodowy fundusz zdrowia w łodzi, przychodnia ożarów mazowiecki ]