Morphometry nie wykazały różnic między P311. /. i myszy WT. Determinacja telemetryczna ujawniła dzienne skurczowe i rozkurczowe ciśnienie krwi wynoszące 16,5. 3 i 14. 5 mmHg niżej, odpowiednio, w P311. /. myszy niż u myszy WT, z nieznacznie zwiększonymi różnicami nocnymi (Figura 1A). Badania echokardiograficzne przeprowadzone u przytomnych myszy wykazały powiększoną średnicę aorty w P311. /. zwierzęta, które zniknęły w znieczuleniu ogólnym (ryc. 1B). Nie stwierdzono istotnych różnic w innych parametrach echokardiograficznych, z wyjątkiem zwiększonego rzutu serca (Suplementalna Figura 2). Łącznie odkrycia te sugerowały obniżenie napięcia mięśniowego, co zostało potwierdzone przez badanie ciśnieniowe przy użyciu tętnic oporowych (średnica około 150 .m) (Figura 1C i Dodatkowa Figura 3). Badania myograficzne na izolowanych aortach wykazały zmniejszoną kurczliwość w odpowiedzi na depolaryzację K + w P311. /. myszy (Figura 1E). Konsekwentnie, P311. /. Tętnice oporowe również wykazywały zmniejszoną kurczliwość w odpowiedzi na K + i agonistów układu zwężenia naczyń (noradrenalina, fenylefryna, epinefryna i angiotensyna II), bez żadnej różnicy w odpowiedzi na wazodilatację względem hydralazyny (Figura 1E i Dodatkowa Figura 4, AEE). P311. /. aorty wykazały zmniejszoną aktywność RhoA, co oceniono na podstawie poziomów RhoA-GTP, jak również fosforylowanej frakcji MYPT1 (Figura 1F). Testy skracania żelu kolagenowego wykazały, że VSMC są izolowane z P311. /. aorty były mniej wydajne pod względem skurczu żeli kolagenowych niż te pochodzące ze zwierząt WT, ale ich skurcz poprawił się po transfekcji P311 (Figura 1, G i H). Rysunek 1P311. /. u myszy wystąpiło systemowe niedociśnienie i zmniejszone napięcie mięśni naczyniowych, kurczliwość i aktywność RhoA. (A) Telemetryczne oznaczanie systemowego ciśnienia krwi w WT i P311. /. myszy (n = 8 na grupę). (B) Echokardiograficzne obrazy średnicy aortalnej u przytomnych i znieczulonych myszy (n = 8 na grupę). Pokazano również średnią średnicę aorty. (C) Ciśnieniowe oznaczanie miogenu w tętnicach oporowych (n = 4 na grupę). (D) Myogenny ton tętnic oporowych w odpowiedzi na 50 mM KCl pod ciśnieniem 75 mmHg. (E) Drutowe badanie miograficzne odpowiedzi skurczowej aort (n = 4 na grupę) i tętnic oporowych (n = 3 na grupę) na zwiększenie stężenia K +. (F) Test aktywności RhoA pokazujący aktywny RhoA i Western blot pokazujący całkowity i ufosforylowany (p-) MYPT1. Eksperymenty przeprowadzono 3 razy z podobnymi wynikami. Względna gęstość sygnału Western blot w P311. /. w stosunku do myszy WT (analizowanych przez oprogramowanie myImageAnalysis, Thermo Scientific). (G) Skurcz żelowy kolagenu przez VSMCs pochodzące z myszy aorty. (H) Skurczenie żelu kolagenowego przez VSMC pochodzące z WT i P311. /. aorty, te ostatnie transfekowane pustym wektorem (EV) lub wektor P311 (60% skuteczność transfekcji). W G i H względny skurcz obliczono jako procentowe zmniejszenie średnicy żelu kolagenu od pierwotnej średnicy. Dane dotyczące skurczu żelu pobrano z potrójnych studzienek. Dane reprezentują średnią. SD. * P <0,05, ** P <0,01, test końcowy ucznia. P311. /. myszy mają obniżony poziom i aktywność TGF-y, ale nie odpowiadają odpowiednim mRNA. Chociaż w czasie rzeczywistym w reakcji PCR wykazano podwyższony poziom mRNA Tgfb1, Tgfb2 i Tgfb3 w tkankach aorty izolowanych z P311 P / l. myszy, ELISA wykazała, że całkowite i aktywne poziomy białka w 3 izoformach były znacznie zmniejszone w ekstraktach tkankowych i w próbkach osocza z P311 P / l. myszy (Figura 2, ACH). Analizy immunoblotów wykazały zmniejszoną ekspresję proTGF-a1, proA TGF-a2, proA TGF-a3 i LAP-1 (figura 2D). Odkryliśmy, że blokowanie TGF-. aktywność skutkowała zmniejszeniem odpowiedzi skurczowej WT i P311. /. arterie odpornościowe pochodzące od myszy. Spadek ten był statystycznie istotny tylko w tętnicach WT, które miały więcej TGF-y. niż ich P311. /. odpowiedniki (rysunek 2E). Hodowle VSMC wykazywały również podwyższone poziomy mRNA Tgfb1, Tgfb2 i Tgfb3, podczas gdy poziomy białka były zmniejszone (Suplemental Fig. 5, A i B). Zgodnie z tymi ustaleniami, zmniejszyła się również fosforylacja trangionalnych koregatorowych Smad2 i Smad3 (Figura 2F). Myszy niosące aktywny TGF-. konstrukt reporterowy, CAGA12 / GFP, wykazał niższą aktywność w P311. /. w porównaniu do zwierząt P311 + / + (Figura 2G). P311. /. VSMC wyizolowane z aort transgenicznych myszy CAGA12 / GFP również wykazywały utratę TGF-a. aktywność względem kontroli WT (dodatkowa Figura 5C). Rysunek 2P311. /. myszy mają obniżony poziom i aktywność TGF-a1, TGF-a2 i TGF-a3 i ich preform, ale nie w odpowiednich mRNA. (A) Real-time PCR pokazujący poziom mRNA dla Tgfb1, Tgfb2 i Tgfb3 w aortach WT i P311. /. myszy [patrz też: kolbuszowa dolna, suplementy na wypadanie włosów, syrop tymiankowy złożony ] [patrz też: polskie towarzystwo ultrasonograficzne, stężenie alkoholu we krwi kalkulator, kalendarz triathlon 2015 ]
Partnerzy serwisu:
Zobacz tez:
Przeciwnie, aktywacja CD eNOS była podobna pod nieobecność lub obecność neutralizującego przeciwciała (stymulacja do 204%. 34% i 188%. 20% podstawowej aktywności, odpowiednio), co jest zgodne z funkcją CD niezależną od… Read More Wiązanie cholesterolu, wypływ i domena oddziałująca z PDZ receptora zmiatającego BI pośredniczy w sygnalizacji inicjowanej przez HDL cd
Myszy FVIIInull immunizowano 200 ul rhBDDFVIII przy 600 U / kg w obecności adiuwanta (Corixa) poprzez wstrzyknięcie ip w celu indukcji przeciwciał przeciw ludzkiemu czynnikowi FVIII. W celu określenia miana… Read More Czynnik VIII, który jest ektopowo ukierunkowany na płytki, jest terapeutyczny w hemofilii A z przeciwciałami hamującymi o wysokim mianie ad 9
Zgodnie z faktem, że aktywny RhoA promuje skurcz mięśni naczyniowych przez hamowanie fosfatazy łańcucha lekkiego miozyny (MLCP, za pośrednictwem fosforylacji regulowanej przez ROCK jego podjednostki regulacyjnej, MYPT1) (28), fosforylowana frakcja… Read More Homeostaza ciśnienia krwi jest utrzymywana przez P311 TGF- oś ad 5