PPAR ligandy hamują wzrost guza pierwotnego i przerzuty przez hamowanie angiogenezy ad 6

Ogólnoustrojowe doustne podawanie rozyglitazonu znacząco hamowało angiogenezę w sposób zależny od dawki: 50 mg / kg / dzień powodowało 39% zahamowanie (Figura 4d); 100 mg / kg / d, 60% (figura 4e); 200 mg / kg / dzień, 61%. Co ciekawe, znacznie wyższe dawki (400 mg / kg / d) powodowały jedynie 18% zahamowanie wzrostu naczyń (Figura 4f). Podawanie rozyglitazonu dwa razy dziennie również znacząco hamowało angiogenezę w dawce 5 mg / kg dwa razy na dobę (36%). Codzienne podawanie wykazywało odpowiedź dwufazową z optymalnym działaniem przy 100. 200 mg / kg / dzień (Figura 4g). Systemowy doustny troglitazon hamował również angiogenezę rogówki wywołaną bFGF (dane nie przedstawione). Leczenie systemowe z PPAR. ligandy hamują różnorodność nowotworów przez hamowanie angiogenezy W celu zbadania, czy terapia antyangiogenna z użyciem PPARa. Ligandy mogą hamować wzrost guzów pierwotnych, leczono ustalone guzy podskórne o objętości 100-200 mm3 hodowane u syngenicznych myszy, jak podano (29). Rozyglitazon w dawce 100 mg / kg / d hamował wzrost glioblastoma, LLC, mięsaka prążkowanokomórkowego i liposiarczaka odpowiednio o 71%, 60%, 82% i 69% (Figura 5, a (d). Nie stwierdzono dowodów na utratę masy ciała lub innych toksyn związanych z lekiem u żadnej z myszy. Na poparcie naszej hipotezy, że PPAR. Ugandy mogą hamować wzrost guza pierwotnego poprzez hamowanie angiogenezy, mierzono gęstość naczyń w guzach leczonych i kontrolnych. Zmniejszenie gęstości naczyń krwionośnych podczas leczenia inhibitorem angiogenezy sugeruje, że środek jest skuteczny (32). Jednakże, ponieważ gęstość mikronaczyń ma ograniczenia jako zastępczy marker aktywności antyangiogennej in vivo (33), mierzyliśmy także proliferację komórek śródbłonka w leczonych i kontrolnych nowotworach. Rycina 5 Leczenie systemowe z PPAR. ligandy hamują wzrost guza pierwotnego. Po wystąpieniu guzów o wielkości 100-200 mm3 rozpoczęto leczenie rozyglitazonem (100 mg / kg / dobę) (dzień 0). W ostatnim dniu leczenia statystyczną różnicę między grupą kontrolną (Ctr; niebieska) i leczoną (różową) określono za pomocą testu ucznia. (a) Glejak (U87) (P <0,01). (b) LLC (P <0,001). (c) Liposarcoma (LS) (P <0,001). (d) mięsak prążkowanokomórkowy (RMS) (p <0,001). Leczenie rozyglitazonem zmniejszało gęstość naczyń w porównaniu z guzami kontrolnymi (Figura 6, a (d). Ponadto, guzy leczone rosiglitazonem nie wykazywały oznak różnicowania cytologicznego in vivo (Figura 6, a (3d, wstawki), podczas gdy in vitro, tylko rozyglitazon indukował różnicowanie komórek liposarcoma (dane nie przedstawione). Stosując podwójne barwienie immunofluorescencyjne dla naczyń (MECA-32) i proliferację (PCNA), stwierdziliśmy znaczący spadek proliferacji komórek śródbłonka w U87 potraktowanych rozyglitazonem (47%) i LLC (44%) w porównaniu z kontrolami (Figura 6e) . Rysunek 6PPAR. terapia ligandem zmniejsza gęstość naczyń i proliferację komórek śródbłonka. (a, niebieska wstawka) Pokazano reprezentatywne kontrolne i leczone nowotwory glejaka w dniu 40 leczenia. Pasek skali, cm. (a. d, wypustki) Barwienie hematoksyliną i eozyną guzów od myszy kontrolnych i leczonych rosiglitazonem nie wykazuje oznak różnicowania cytologicznego. Zarówno w liposarcomacie, jak i mięśniakomięsaku prążkowanym zaobserwowano zwiększoną martwicę (n) w leczonych guzach. Pasek skali, 200 .m. (a (d) W każdym panelu oś x przedstawia gęstość naczyń zdefiniowaną jako procent powierzchni naczynia (CD31) / obszar guza w każdym polu guza. Oś y wskazuje procent analizowanych pól przy danej gęstości naczyń. Bary po prawej stronie przedstawiają pola o większej gęstości mikronaczyniowej. Po leczeniu rozyglitazonem zaobserwowano znaczny spadek gęstości naczyń we wszystkich nowotworach, jak wskazano przez przesunięcie w lewo wszystkich histogramów (P <0,001). Na przykład w glioblastomie leczonym rosiglitazonem gęstość naczyń o gęstości 4% występuje w 28% wszystkich zliczonych pól. Całkowita liczba pól uzyskanych na guz (Ctr: Rosi): U87, 124: 178; LLC, 163: 131; LS, 186: 178; RMS, 314: 229. (e) proliferacja komórek śródbłonka (EC) w guzach leczonych rosiglitazonem i kontrolnych guzach U87 i LLC, jak określono przez immunofluorescencyjne podwójne barwienie (MECA-32 i PCNA). U87, P <0,001; LLC, P <0,05. Całkowita liczba pól przypadająca na jeden nowotwór (Ctr: Rosi): LLC, 36:26; U87, 34:33. Aby wykluczyć możliwość lokalizacji guza podskórnego pod kątem wrażliwości na terapię antyangiogenną za pomocą TZD, użyliśmy ortotopowego modelu ludzkiego raka prostaty (24). Linia komórkowa prostaty (LNCaP) słabo eksprymuje PPARa, jest stosunkowo oporna na TZD in vitro i wytwarza PSA (9). Traktowaliśmy ustalone ortotopowe guzy prostaty z PSA w surowicy pomiędzy 40 a 60 ng / ml. Po 17 dniach leczenia rozyglitazonem (100 mg / kg / d) lub troglitazonem (200 mg / kg / dobę), PSA wynosiły 73. 37 ng / ml lub 100. 45 ng / ml, odpowiednio, w porównaniu z grupą kontrolną 235. 47 ng / ml [podobne: krem pod oczy z peptydami, polskie towarzystwo ultrasonograficzne, sok z buraka właściwości ] [podobne: narodowy fundusz zdrowia w łodzi, przychodnia ożarów mazowiecki, badanie kału na pasożyty ]