Składnik Lewisa X w ludzkim mleku wiąże DC-SIGN i hamuje transfer HIV-1 do limfocytów T CD4 + ad 7

Multimeryczny LeX nie był w stanie hamować perełek powleczonych gp120 wiążących się z komórkowym DC-SIGN, prawdopodobnie z powodu wysokiej awidności tego oddziaływania lub różnicy w interakcji monomerycznej ekspresji gp120 na perełki fluorescencyjne w porównaniu do trimerycznej ekspresji gp120 na cząstka HIV-1. Obserwowana różnica w zdolności LeX Ab do blokowania działania hamującego ludzkiego mleka w teście transferu Raji-DC-SIGN i badaniu ELISA jest prawdopodobnie wynikiem różnic w konfiguracji DC-SIGN. Na powierzchni komórki DC-SIGN występuje w postaci tetrameru, podczas gdy w teście ELISA DC-SIGN-Fc receptor najprawdopodobniej jest monomerem lub dimerem, co może prowadzić do słabszej interakcji. Te różnice w konfiguracjach cząsteczek DC-SIGN testowanych w różnych testach sugerują, że należy zachować ostrożność podczas interpretacji wyników. W poprzednich badaniach odnotowano, że miejsca wiązania LeX i gp120 są odrębne, ale zachodzą na siebie (54, 56, 63). Wyjaśnienie dla naszego obserwowanego hamowania przez ludzkie mleko może polegać na tym, że większe związki blokują interakcję gp120 i DC-SIGN poprzez przeszkodę przestrzenną przez większy ogon. DC-SIGN tworzy strukturę tetrameryczną na powierzchni komórki (1), która może również powodować zamknięcie miejsca wiązania gp120 przez oddziaływanie kilku reszt LeX z różnymi monomerycznymi receptorami DC-SIGN. Najprawdopodobniej oddziaływanie kilku motywów LeX z tetramerycznym DC-SIGN prowadzi do znacznie silniejszej interakcji związku i ponownie zapobiega wystarczającemu wiązaniu gp120 i późniejszemu transferowi wirusa. Wcześniej wykazano, że DC-SIGN może oddziaływać z szeregiem innych patogenów, w tym z wirusowym zapaleniem wątroby typu C (9, 10), Ebolą (11), wirusem cytomegalii (12) i wirusem Dengue (13), jak również z Mycobacterium (14). 16), Leishmania (17, 18), Candida albicans (19) i Helicobacter pylori (20, 21). Interakcja związków mleka ludzkiego zawierających LeX z DC-SIGN może wpływać na odpowiedzi odpornościowe u dziecka wywołane przez nadchodzące patogeny, zapobiegając ich interakcji z DC, a tym samym zapobiegając prezentacji antygenów specyficznych dla patogenu, a następnie aktywacji limfocytów T CD4 +. Może to być mechanizm, w którym poziomy aktywacji immunologicznej są buforowane u noworodków, aby zapobiec nadmiernej stymulacji układu odpornościowego lub uginać specyficzne odpowiedzi immunologiczne w pewnym kierunku. Rzeczywiście, doniesiono wcześniej, że myszy immunizowane donosowo LNFP IIIa HSA wykazywały silniejszą indukcję odpowiedzi immunologicznych typu Th2 w porównaniu z Th1 (64). Wynik ten koresponduje z faktem, że interakcje Helicobacter pylori z DCX-dodatnimi lekami mogą blokować odpowiedzi komórek indukowane przez Th1, co powoduje względne wzmocnienie odpowiedzi komórek Th2 (21), co sugeruje, że związki LeX mogą wpływać na generowane odpowiedzi immunologiczne i że związki LeX w ludzkim mleku mogą funkcjonować jako czynniki immunomodulujące. Interesujące będzie zatem zbadanie, czy niemowlęta karmione piersią czy karmione butelką mają różnice w odpowiedziach immunologicznych na doustne patogeny przenoszone drogą pokarmową. Donoszono również, że wyjściowa aktywacja limfocytów jest wyższa u karmionych butelką niż u niemowląt karmionych piersią (65). Podjęto szereg wyjaśnień, w tym różnice w ekspozycji na obce białka lub większą różnorodność mikroflory jelitowej. Inną możliwością jest to, że ludzkie związki mleka zawierające motyw LeX buforują odpowiedź immunologiczną przez wiązanie DC-SIGN i że te związki nie występują w mleku w mleku modyfikowanym lub krowie. Przyszłe prace będą musiały określić znaczenie biologiczne interakcji związków zawierających LeX z DC-SIGN w odniesieniu do stymulacji układu odpornościowego i znaczenia dla MTCT HIV-1 i innych patogenów. Dalsza identyfikacja i charakterystyka konkretnego związku (ów) zawierającego (ych) Lex (y) wchodzącego w interakcję z DC-SIGN może mieć istotne implikacje dla rozwoju środków przeciwdrobnoustrojowych mających na celu zapobieganie przenoszeniu HIV-1 nie tylko poprzez karmienie piersią, ale także poprzez aktywność seksualną. Metody Komórki. Kontrolną linię komórkową Raji i linie komórkowe wyrażające zarówno DC-SIGN (Raji-DC-SIGN), jak i L-SIGN (Raji-L-SIGN) hodowano jak opisano wcześniej (4). PBMC izolowano z kożuszków leukocytowych za pomocą standardowego wirowania Ficoll-Hypaque, aktywowanego za pomocą fitohemaglutyniny (3 .g / ml) i hodowano w pożywce RPMI zawierającej 10% FCS, penicylinę (100 jednostek / ml) i streptomycynę (100 jednostek / ml ). W dniu 3 komórki poddano wzbogaceniu CD4 + przez inkubację z perełkami immunomagnetycznymi CD8 (Dynal Biotech) i selekcjonowano je negatywnie zgodnie z instrukcjami producenta i hodowano z IL-2 (100 U / ml)
[podobne: wydłużenie etapu edukacyjnego uzasadnienie, narodowy fundusz zdrowia w łodzi, syrop tymiankowy złożony ]
[przypisy: polskie towarzystwo ultrasonograficzne, stężenie alkoholu we krwi kalkulator, kalendarz triathlon 2015 ]