Patologia zależna od androgenów demonstruje miopatyczny wkład w fenotyp choroby Kennedyego w modelu myszy typu knock-in ad 9

Lizat próbki o wadze 2 mg oczyszczono przez inkubację z kulkami agarozowymi białka A / G w 4 ° C przez 10 minut. Supernatant zebrano, następnie zmieszano z kulkami agarozowymi sprzężonymi z N-20P i delikatnie kołysano w 4 ° C przez noc. Perełki przemyto dokładnie lodowato zimnym PBS, ponownie zawieszono w 2 x buforze do próbek i gotowano przez 5 minut. Próbki rozdzielono za pomocą 10% SDS-PAGE i przeniesiono na membrany nitrocelulozowe (Bio-Rad); białka wizualizowano za pomocą chemiluminescencji (PerkinElmer). Immunohistochemia i immunofluorescencja. Continue reading „Patologia zależna od androgenów demonstruje miopatyczny wkład w fenotyp choroby Kennedyego w modelu myszy typu knock-in ad 9”

Patologia zależna od androgenów demonstruje miopatyczny wkład w fenotyp choroby Kennedyego w modelu myszy typu knock-in ad

Dane te wskazują, że aspekty fenotypu Kennedy ego uprzednio przypisane częściowej utracie funkcji AR są w rzeczywistości za pośrednictwem toksyczności powodowanej przez rozszerzony układ glutaminowy. Tutaj scharakteryzujemy fenotyp nerwowo-mięśniowy myszy AR113Q. Zmutowane samce wykazują osłabienie nerwowo-mięśniowe zależne od androgenu. Patologia mięśni szkieletowych poprzedza patologiczne zmiany w rdzeniu kręgowym, wykazuje dowody zarówno działania miopatycznego, jak i atrofii neurogennej, w której pośredniczy rozszerzony glutaminowy AR, i odtwarza mieszane cechy wcześniej opisane w mięśniu Kennedyego (29, 30). Samce AR113Q niespodziewanie umierają w młodym wieku, a nasze analizy wskazują na zmienioną pobudliwość błony mięśniowej w patogenezie. Continue reading „Patologia zależna od androgenów demonstruje miopatyczny wkład w fenotyp choroby Kennedyego w modelu myszy typu knock-in ad”

Składnik Lewisa X w ludzkim mleku wiąże DC-SIGN i hamuje transfer HIV-1 do limfocytów T CD4 + cd

W dniu 7 stężenia CA-p24 określono standardowym testem ELISA. Procentowe hamowanie określono w odniesieniu do stężenia CA-p24 odpowiedniego wzbogaconego kontrolnego PBS. Ludzki związek (e) mleka wiąże się z DC-SIGN, zapobiegając w ten sposób przeniesieniu HIV-1 do limfocytów T CD4 +. Aby ustalić, czy hamujący wpływ ludzkiego mleka na transfer wirusowy, w którym pośredniczy Raji-DC-SIGN, był spowodowany interakcją mleka ludzkiego z HIV-1 lub DC-SIGN, przeprowadziliśmy eksperymenty z inkubacją wstępną zarówno komórek Raji-DC-SIGN, jak i HIV. z ludzkim mlekiem. Continue reading „Składnik Lewisa X w ludzkim mleku wiąże DC-SIGN i hamuje transfer HIV-1 do limfocytów T CD4 + cd”

Bcl-2-zależne utlenianie pirogronianowej dehydrogenazy-E2, pierwotnego autoantygenu żółciowej dróg żółciowych, podczas apoptozy ad 5

Przeciwnie, barwienie COX-1 w apoptotycznej HeLa było łatwe do wykrycia i podobne do tego w apoptotycznych NRC. Aby lepiej zrozumieć tę różnicę w barwieniu PDC-E2 w apoptotycznych komórkach HeLa w porównaniu z apoptotycznymi NRC, zbadaliśmy zarówno dodatkowe typy komórek, jak i inne bodźce apoptotyczne. Po traktowaniu UV-B stwierdzono silne zabarwienie PDC-E2 w apoptotycznych HSG (fig. 4j) jak w NRC, natomiast utrata barwienia PDC-E2 w apoptotycznych komórkach T Jurkat (Figura 4) jak w komórkach HeLa. HSG badano, ponieważ uszkodzenie gruczołów ślinowych w PBC jest dość powszechne. Continue reading „Bcl-2-zależne utlenianie pirogronianowej dehydrogenazy-E2, pierwotnego autoantygenu żółciowej dróg żółciowych, podczas apoptozy ad 5”

Homeostaza ciśnienia krwi jest utrzymywana przez P311 TGF- oś ad 7

Dane z WT i P311. /. myszy zbierano przez okres tygodnia i analizowano za pomocą oprogramowania Dataquest ART (dostarczonego przez Data Sciences International). Pletyzmograficzne ciśnienie krwi rejestrowano za pomocą 8-kanałowego nieinwazyjnego systemu pobierania krwi CODA (Kent Scientific) zgodnie z protokołem producenta. Myszy umieszczono w przezroczystym akrylowym ograniczniku z wbudowanym stożkiem nosowym przez co najmniej 30 minut przed uzyskaniem pomiarów ciśnienia. Continue reading „Homeostaza ciśnienia krwi jest utrzymywana przez P311 TGF- oś ad 7”

Czynnik VIII, który jest ektopowo ukierunkowany na płytki, jest terapeutyczny w hemofilii A z przeciwciałami hamującymi o wysokim mianie ad 7

To może zapewnić pacjentowi samoreplikującą się pulę komórek macierzystych, która będzie wspierać trwającą przez całe życie ekspresję transgenu FVIII w ich megakariocytach i płytkach krwi. Chroniona uwalniana pula FVIII w płytkach krwi zmniejszyłaby skazę krwotoczną nie tylko u pacjentów z hemofilią A, ale także u osób z przeciwciałami hemofilią A i przeciwciałami FVIII. Podczas gdy ta ostatnia grupa nie była wcześniej uważana za kandydata do terapii genowej FVIII, nasze obecne badania sugerują nowe podejście, które może być korzystne. Metody Konstrukcja wektora. Ludzki cDNA FVIII zastosowany w tym badaniu usunął całą domenę B FVIII i był miłym darem RJ Kaufmana (University of Michigan, Ann Arbor, Michigan, USA). Continue reading „Czynnik VIII, który jest ektopowo ukierunkowany na płytki, jest terapeutyczny w hemofilii A z przeciwciałami hamującymi o wysokim mianie ad 7”

Hamowanie nefropatii cukrzycowej przez peptyd wabika odpowiadający uchwytowi region dla nieprololitycznej aktywacji proreniny ad 9

Natychmiast po dekapitowaniu pobrano 3 ml próbkę krwi do probówki zawierającej 30 ul EDTA (500 mM), 15 ul enalaprylu (1 mM) i 30 ul o-fenantroliny (24,8 mg / ml) i pepstatynę (0,2 mM), a próbki osocza uzyskano przez odwirowanie. Aktywność reniny w osoczu określono za pomocą zestawu kulek powleczonych RIA (Dinabott Radioisotope Institute). Poziom proreniny w plazmie obliczono przez odjęcie aktywności reninowej osocza od całkowitej aktywności osocza (nieaktywny plus aktywny), jak opisano wcześniej (31). W celu pomiaru całkowitej zawartości reniny w nerkach zważono część usuniętej nerki, umieszczono w 5 ml buforu zawierającego 2,6 mM EDTA, 1,6 mM dimerkaprolu, 3,4 mM siarczanu 8-hydroksychinoliny, 0,2 mM PMSF i 5 mM octanu amonu, homogenizowane za pomocą schłodzonego homogenizatora szklanego, a następnie odwirowywane. Aktywność reniny w supernatancie określono w sposób opisany uprzednio (32). Continue reading „Hamowanie nefropatii cukrzycowej przez peptyd wabika odpowiadający uchwytowi region dla nieprololitycznej aktywacji proreniny ad 9”

Hamowanie nefropatii cukrzycowej przez peptyd wabika odpowiadający uchwytowi region dla nieprololitycznej aktywacji proreniny ad

Rekombinowaną szczurzą proreninę analizowano metodą immunoblottingu przy użyciu 3 nM oczyszczonego Ab do HRP pod nieobecność (a) ścieżki 1) lub obecności (3M regionalnych peptydów prosegmentu proreninowego, SFGR (linia 2), MTRISAE (linia 3), lub RILLKKMPSV (ścieżka 4). Obraz pokazuje, że HRP wiąże się z przeciwciałem anty-HRP z wysokim powinowactwem i hamuje wiązanie rekombinowanej proreniny z anty-HRP-Ab. Podobne wyniki uzyskano również przy 10 i 100 nM RILLKKMPSV. (B) Rekombinowaną szczurzą proreninę (PR) (ścieżki i 3) i reninę (R) (ścieżki 2 i 4) analizowano przez immunoblotting z użyciem anty-szczurzego reniny Ab w nieobecności (ścieżki i 2) lub obecności 1. M HRP, RILLKKMPSV (ścieżki 3 i 4). Continue reading „Hamowanie nefropatii cukrzycowej przez peptyd wabika odpowiadający uchwytowi region dla nieprololitycznej aktywacji proreniny ad”

PPAR ligandy hamują wzrost guza pierwotnego i przerzuty przez hamowanie angiogenezy cd

Po 24 godzinach komórki głodzono przez 12 godzin w 0,5% FBS. Komórki traktowano TZD rozpuszczonymi w 0,1% DMSO. Pożywkę zmieniono w dniach 3 i 5. Komórki zliczono z licznikiem cząstek w dniach 3 i 7. Testy z użyciem kurzowo-kosmówkowej błonki (CAM) przeprowadzono w trzech oddzielnych eksperymentach, jak opisano (23). Continue reading „PPAR ligandy hamują wzrost guza pierwotnego i przerzuty przez hamowanie angiogenezy cd”

CEACAM6 działa jako receptor adherentno-inwazyjnych E. coli, wspomagając kolonię błony śluzowej jelita cienkiego w chorobie Leśniowskiego-Crohna ad 5

Analiza Western blot przy użyciu przeciwciał monoklonalnych CEACAM6 klon 9A6 i anty – aktyna. Dziesięć mikrogramów całkowitego białka z różnych linii komórek nabłonka jelitowego wprowadzono do 4%> 12% żelu Tris-glicynowego. (B) Analiza mikroskopowa konfokalna zróżnicowanych komórek Caco-2 zakażonych bakteriami LF82 eksprymującymi GFP. Oryginalne powiększenie, × 400. CEACAM6 wykrywano przy użyciu klonu monoklonalnego anty-CEACAM6 9A6 i sprzężonej z czerwienią Texas anty-mysiej IgG (górny panel). Continue reading „CEACAM6 działa jako receptor adherentno-inwazyjnych E. coli, wspomagając kolonię błony śluzowej jelita cienkiego w chorobie Leśniowskiego-Crohna ad 5”