Patologia zależna od androgenów demonstruje miopatyczny wkład w fenotyp choroby Kennedyego w modelu myszy typu knock-in ad 9

Lizat próbki o wadze 2 mg oczyszczono przez inkubację z kulkami agarozowymi białka A / G w 4 ° C przez 10 minut. Supernatant zebrano, następnie zmieszano z kulkami agarozowymi sprzężonymi z N-20P i delikatnie kołysano w 4 ° C przez noc. Perełki przemyto dokładnie lodowato zimnym PBS, ponownie zawieszono w 2 x buforze do próbek i gotowano przez 5 minut. Próbki rozdzielono za pomocą 10% SDS-PAGE i przeniesiono na membrany nitrocelulozowe (Bio-Rad); białka wizualizowano za pomocą chemiluminescencji (PerkinElmer). Immunohistochemia i immunofluorescencja. Continue reading „Patologia zależna od androgenów demonstruje miopatyczny wkład w fenotyp choroby Kennedyego w modelu myszy typu knock-in ad 9”

Patologia zależna od androgenów demonstruje miopatyczny wkład w fenotyp choroby Kennedyego w modelu myszy typu knock-in ad

Dane te wskazują, że aspekty fenotypu Kennedy ego uprzednio przypisane częściowej utracie funkcji AR są w rzeczywistości za pośrednictwem toksyczności powodowanej przez rozszerzony układ glutaminowy. Tutaj scharakteryzujemy fenotyp nerwowo-mięśniowy myszy AR113Q. Zmutowane samce wykazują osłabienie nerwowo-mięśniowe zależne od androgenu. Patologia mięśni szkieletowych poprzedza patologiczne zmiany w rdzeniu kręgowym, wykazuje dowody zarówno działania miopatycznego, jak i atrofii neurogennej, w której pośredniczy rozszerzony glutaminowy AR, i odtwarza mieszane cechy wcześniej opisane w mięśniu Kennedyego (29, 30). Samce AR113Q niespodziewanie umierają w młodym wieku, a nasze analizy wskazują na zmienioną pobudliwość błony mięśniowej w patogenezie. Continue reading „Patologia zależna od androgenów demonstruje miopatyczny wkład w fenotyp choroby Kennedyego w modelu myszy typu knock-in ad”

Składnik Lewisa X w ludzkim mleku wiąże DC-SIGN i hamuje transfer HIV-1 do limfocytów T CD4 + czesc 4

Komórki DC-SIGN-dodatnie i pozorowane komórki Raji inkubowano z buforem jako kontrolą. W celu określenia specyficzności obserwowanego wiązania, komórki inkubowano z AZN-D1, EGTA i mannanem przed dodaniem perełek gp120. * P <0,05 w porównaniu ze sterowaniem PBS. (C) Ludzkie mleko (1:20) pokryto przed dodaniem DC-SIGN-Fc. Specyficzność obserwowanego wiązania określono przez preinkubację DC-SIGN-Fc z AZN-D1 i EGTA. Continue reading „Składnik Lewisa X w ludzkim mleku wiąże DC-SIGN i hamuje transfer HIV-1 do limfocytów T CD4 + czesc 4”

Bcl-2-zależne utlenianie pirogronianowej dehydrogenazy-E2, pierwotnego autoantygenu żółciowej dróg żółciowych, podczas apoptozy ad 5

Przeciwnie, barwienie COX-1 w apoptotycznej HeLa było łatwe do wykrycia i podobne do tego w apoptotycznych NRC. Aby lepiej zrozumieć tę różnicę w barwieniu PDC-E2 w apoptotycznych komórkach HeLa w porównaniu z apoptotycznymi NRC, zbadaliśmy zarówno dodatkowe typy komórek, jak i inne bodźce apoptotyczne. Po traktowaniu UV-B stwierdzono silne zabarwienie PDC-E2 w apoptotycznych HSG (fig. 4j) jak w NRC, natomiast utrata barwienia PDC-E2 w apoptotycznych komórkach T Jurkat (Figura 4) jak w komórkach HeLa. HSG badano, ponieważ uszkodzenie gruczołów ślinowych w PBC jest dość powszechne. Continue reading „Bcl-2-zależne utlenianie pirogronianowej dehydrogenazy-E2, pierwotnego autoantygenu żółciowej dróg żółciowych, podczas apoptozy ad 5”

Homeostaza ciśnienia krwi jest utrzymywana przez P311 TGF- oś ad 7

Dane z WT i P311. /. myszy zbierano przez okres tygodnia i analizowano za pomocą oprogramowania Dataquest ART (dostarczonego przez Data Sciences International). Pletyzmograficzne ciśnienie krwi rejestrowano za pomocą 8-kanałowego nieinwazyjnego systemu pobierania krwi CODA (Kent Scientific) zgodnie z protokołem producenta. Myszy umieszczono w przezroczystym akrylowym ograniczniku z wbudowanym stożkiem nosowym przez co najmniej 30 minut przed uzyskaniem pomiarów ciśnienia. Continue reading „Homeostaza ciśnienia krwi jest utrzymywana przez P311 TGF- oś ad 7”

Czynnik VIII, który jest ektopowo ukierunkowany na płytki, jest terapeutyczny w hemofilii A z przeciwciałami hamującymi o wysokim mianie ad 8

Otrzymany supernatant zastosowano do oznaczenia uwolnionego FVIII: C. Mysie osocze rozcieńczono 1:40 w zmodyfikowanym buforze Tyrode i 25 ul rozcieńczonego osocza, uwolnionego z płytek lub seryjnie rozcieńczonego lizatu płytek dodano do zablokowanych 96-studzienkowych płytek do mikromiareczkowania w trzech powtórzeniach. Składniki testu, w tym FIXa, FX, CaCl2 i fosfolipid, dodano do każdej studzienki i płytki inkubowano przez 10 minut w 37 ° C. Dodano chromogenny substrat czynnika Xa S-2222 i płytkę przeniesiono natychmiast do czytnika mikropłytek ThermoMax (Molecular Devices) wstępnie ustawionego na 37 ° C. Standardową krzywą skonstruowano przez wykreślenie znanych ilości rhBDDFVIII (Refacto; Wyeth) w odpowiednim buforze względem Vmax (mOD / min) przy 405 nm. Continue reading „Czynnik VIII, który jest ektopowo ukierunkowany na płytki, jest terapeutyczny w hemofilii A z przeciwciałami hamującymi o wysokim mianie ad 8”

Hamowanie nefropatii cukrzycowej przez peptyd wabika odpowiadający uchwytowi region dla nieprololitycznej aktywacji proreniny ad 9

Natychmiast po dekapitowaniu pobrano 3 ml próbkę krwi do probówki zawierającej 30 ul EDTA (500 mM), 15 ul enalaprylu (1 mM) i 30 ul o-fenantroliny (24,8 mg / ml) i pepstatynę (0,2 mM), a próbki osocza uzyskano przez odwirowanie. Aktywność reniny w osoczu określono za pomocą zestawu kulek powleczonych RIA (Dinabott Radioisotope Institute). Poziom proreniny w plazmie obliczono przez odjęcie aktywności reninowej osocza od całkowitej aktywności osocza (nieaktywny plus aktywny), jak opisano wcześniej (31). W celu pomiaru całkowitej zawartości reniny w nerkach zważono część usuniętej nerki, umieszczono w 5 ml buforu zawierającego 2,6 mM EDTA, 1,6 mM dimerkaprolu, 3,4 mM siarczanu 8-hydroksychinoliny, 0,2 mM PMSF i 5 mM octanu amonu, homogenizowane za pomocą schłodzonego homogenizatora szklanego, a następnie odwirowywane. Aktywność reniny w supernatancie określono w sposób opisany uprzednio (32). Continue reading „Hamowanie nefropatii cukrzycowej przez peptyd wabika odpowiadający uchwytowi region dla nieprololitycznej aktywacji proreniny ad 9”

Hamowanie nefropatii cukrzycowej przez peptyd wabika odpowiadający uchwytowi region dla nieprololitycznej aktywacji proreniny ad

Rekombinowaną szczurzą proreninę analizowano metodą immunoblottingu przy użyciu 3 nM oczyszczonego Ab do HRP pod nieobecność (a) ścieżki 1) lub obecności (3M regionalnych peptydów prosegmentu proreninowego, SFGR (linia 2), MTRISAE (linia 3), lub RILLKKMPSV (ścieżka 4). Obraz pokazuje, że HRP wiąże się z przeciwciałem anty-HRP z wysokim powinowactwem i hamuje wiązanie rekombinowanej proreniny z anty-HRP-Ab. Podobne wyniki uzyskano również przy 10 i 100 nM RILLKKMPSV. (B) Rekombinowaną szczurzą proreninę (PR) (ścieżki i 3) i reninę (R) (ścieżki 2 i 4) analizowano przez immunoblotting z użyciem anty-szczurzego reniny Ab w nieobecności (ścieżki i 2) lub obecności 1. M HRP, RILLKKMPSV (ścieżki 3 i 4). Continue reading „Hamowanie nefropatii cukrzycowej przez peptyd wabika odpowiadający uchwytowi region dla nieprololitycznej aktywacji proreniny ad”

PPAR ligandy hamują wzrost guza pierwotnego i przerzuty przez hamowanie angiogenezy czesc 4

Co ciekawe, PPAR. Białko było wysoce eksprymowane w izolowanych komórkach śródbłonka nowotworowego (Figura 1c). Ponadto obserwowaliśmy wyższe poziomy ekspresji PPAR. w komórkach śródbłonka niż w komórkach nowotworowych, gdy oba typy komórek zostały wyizolowane z nowotworów LLC wyrażających GFP (Figura 1d). Ponadto porównaliśmy PPAR. Continue reading „PPAR ligandy hamują wzrost guza pierwotnego i przerzuty przez hamowanie angiogenezy czesc 4”

CEACAM6 działa jako receptor adherentno-inwazyjnych E. coli, wspomagając kolonię błony śluzowej jelita cienkiego w chorobie Leśniowskiego-Crohna ad 5

Analiza Western blot przy użyciu przeciwciał monoklonalnych CEACAM6 klon 9A6 i anty – aktyna. Dziesięć mikrogramów całkowitego białka z różnych linii komórek nabłonka jelitowego wprowadzono do 4%> 12% żelu Tris-glicynowego. (B) Analiza mikroskopowa konfokalna zróżnicowanych komórek Caco-2 zakażonych bakteriami LF82 eksprymującymi GFP. Oryginalne powiększenie, × 400. CEACAM6 wykrywano przy użyciu klonu monoklonalnego anty-CEACAM6 9A6 i sprzężonej z czerwienią Texas anty-mysiej IgG (górny panel). Continue reading „CEACAM6 działa jako receptor adherentno-inwazyjnych E. coli, wspomagając kolonię błony śluzowej jelita cienkiego w chorobie Leśniowskiego-Crohna ad 5”