Wywołany przez czujnik IFN typ I IFN zapobiega cukrzycy wywołanej przez wirus komórek tropikalnych u myszy cd

Nasze eksperymenty sugerują, że MDA5 odgrywa dominującą rolę w ochronie przed zapaleniem mięśnia sercowego wywołanego EMCV-D, z podrzędnym wkładem TLR3. Figura 2MDA5 kontroluje zakażenie EMCV-D w sercu. Myszy WT i KO zakażono 103 PFU z EMCV-D. Surowicę i serce (n = 6 na punkt czasowy, 3 niezależne eksperymenty) zebrano w dniach 2, 4 i 7 z myszy, które przeżyły i oceniono na poziomy (A) troponiny za pomocą testu ELISA i miana wirusa (B) za pomocą testu łysinkowego lub ustalono w formalinie i parafinie osadzonej dla histologii. Skrawki tkanek wybarwiono na obecność antygenu EMCVpol metodą immunohistochemiczną (C) (lewa kolumna: oryginalne powiększenie, x 100-krotne powiększenie, pręty skali: 200 mikronów, prawidłowa kolumna: oryginalne powiększenie, x 400; pręty skali: 50 mikronów) lub zabarwione H & E i oceniono w przypadku patologii (D) (oryginalne powiększenie, x 100, pasek skali: 200 mikronów). W C silna i rozproszona reaktywność EMCVpol jest szczególnie widoczna w mięśniu sercowym Mda5. /. i DKO; w przeciwieństwie do serca z WT i Tlr3. /. zwierzęta wykazywały tylko łagodne (WT) lub ogniskowe (Tlr3 A / P) zabarwienie, co pokazano szczegółowo w prawym panelu. W D, obszary zapalenia mięśnia sercowego obserwuje się w WT i Tlr3a /. w dniu 7 PI, a także w Mda5. /. dzień 4 PI; tylko lekkie zapalenie obserwuje się w Tlr3. /. dzień 4 PI. Istotność statystyczną obliczono za pomocą testu dwustronnego dla ucznia i pokazano następująco: * P <0,05; ** P <0,01; *** P <0,001. TLR3 i MDA5 mają nieprzebrane role w kontroli infekcji EMCV-D wysp trzustkowych. Wcześniej wykazano, że EMCV-D infekuje trzustkę, szczególnie wysepkę. komórki, co prowadzi do rozwoju cukrzycy u podatnych szczepów myszy (np. DBA / 2) (46). Jednakże myszy C57BL / 6 są normalnie oporne na cukrzycę indukowaną EMCV-Dp, i odpowiednio, myszy WT utrzymywały normalne poziomy glukozy w surowicy po zakażeniu EMCV-D (Figura 3A). Myszy WT również nie wykazały wzrostu enzymów trzustkowych amylazy lub lipazy w surowicy, co sugeruje brak znaczącego uszkodzenia zewnątrzwydzielniczej trzustki (Figura 3B). Miana EMCV-D w trzustce po zakażeniu EMCV-D były zwiększone w dniu do 3 PI, ale usuwane w ciągu tygodnia (Figura 3C), a antygen wirusowy i naciek zapalny były ledwo wykrywalne (Figura 3, D i E). Podobny do myszy WT, Tlr3. /. myszy wykazywały minimalny wzrost amylazy lub lipazy w surowicy (Figura 3B). Jednak Tlr3. /. u myszy rozwinęła się głęboka hiperglikemia do dnia 5 (Figura 3A), a do dnia 7 utraciła prawie całą masę wysepek w trzustce, ocenianą przez barwienie H & E (Figura 3E). Tlr3. /. myszy otrzymywały wyższe miana wirusa w trzustce w dniach i 2 PI w porównaniu z WT i Mda5. /. myszy, ale normalny klirens EMCV-D do 7 dnia (Figura 3C). Co więcej, barwienie antygenem EMCV koncentrowało się głównie na wysepkach Tlr3a / r. myszy (rysunek 3D). Tak więc TLR3 jest niezbędny do ochrony trzustki wewnątrzwydzielniczej przed zakażeniem EMCV-D. Figura 3TLR3 i MDA5 chronią trzustkowe wysepki przed zakażeniem EMCV-D. Myszy WT i KO zainfekowano 103 PFU EMCV-D. Próbki surowicy oceniano dla (A) glukozy we krwi (n8) lub (B) amylazy i lipazy (n4) we wskazanych czasach po zakażeniu w 2 niezależnych doświadczeniach. Trzustkę zebrano we wskazanych czasach i określono miano wirusa za pomocą testu łysinkowego (C) (n = 6 na punkt czasowy, 3 niezależne eksperymenty) lub utrwalono w formalinie i zatopiono w parafinie dla histologii. Skrawki tkanki wybarwiono stosując anty-EMCVpol (D) za pomocą immunohistochemii (n> 3) w celu wizualizacji infiltracji wirusów (oryginalne powiększenie, × 100; pręty skali: 200 mikronów) lub H & E i oceniono pod kątem patologii (E) (oryginalne powiększenie, × 200; pręty skali: 100 mikronów). Aby dokładniej zbadać rolę MDA5 w ochronie trzustki, Mda5 + /. zwierzęta na podłożu C57BL / 6 zakażono EMCV-D równolegle z WT i Mda5a / r. zwierząt i oceniano pod względem stężenia glukozy we krwi (F) i miana wirusa trzustki (G) (n = 5). Ponadto Mda5. /. zwierzęta na tle 129 / SvJ oceniano pod kątem hiperglikemii (H) (n = 12) po zakażeniu EMCV-D. Istotność statystyczną obliczono za pomocą testu dwustronnego dla ucznia i pokazano następująco: * P <0,05; ** P <0,01; *** P <0,001. Mda5. /. myszy nie wykazywały hiperglikemii i tylko nieznaczny, nieistotny wzrost amylazy i lipazy w surowicy w dniach 2 i 4 PI (Figura 3, A i B, i dane nie pokazane). Miana wirusów były podobne do tych dla zwierząt WT w dniu PI, ale znacznie wzrosły w dniu 2 PI (25-krotnie, P <0,05) i pozostały podwyższone (160-krotnie, P <0,01), aż myszy umarły (Figura 3C) [więcej w: krem pod oczy z peptydami, wydłużenie etapu edukacyjnego uzasadnienie, wirusowe zapalenie krtani ] [więcej w: zdrowe odżywianie dzieci, syrop tymiankowy złożony, narodowy fundusz zdrowia w łodzi ]